Специфика исследования методом ПЦР

Анализ кала на ПЦР выявляет возбудителей инфекционных заболеваний и дифференцирует их разновидность на генно-молекулярном уровне. В ходе исследования оцениваются макромолекулы ДНК (дезоксирибонуклеиновой кислоты) бактерий, простейших паразитов, глистов или РНК (рибонуклеиновой кислоты) вирусов. Для идентификации достаточно небольшого фрагмента патогена, обнаруженного в экскрементах.

В задачи молекулярной диагностики входит:

• обнаружение инфекционного агента;
• идентификация разновидности микроорганизма (вирус, бактерия, простейший и т. д.);
• дифференциация типа, рода, семейства и т. д.;
• определение тактики лечения, в соответствии с диагностированным заболеванием.

Образец биоматериала помещают в реактор (амплификатор), добавляют реакционную смесь. При последовательной смене температурного режима разрываются водородные цепи дезоксирибонуклеиновой кислоты, образуются комплексы матрицы с праймерами – короткими генетическими фрагментами.

Реагенты достраивают матричную цепь и в ходе реакции амплификации формируют множественные копии возбудителя. При достаточном количестве копий амплификатор дает качественно-количественную оценку обнаруженному возбудителю.

Макромолекулы РНК и ДНК являются носителями уникальной информации, характерной для определенного вида, поэтому точность результатов ПЦР-диагностики максимально приближена к 100%.

Расшифровка результатов копрограммы (по количеству, форме, цвету, запаху, кислотности, микроскопическим характеристикам)

Изменение количества каловых масс может указывать на:

• нарушения всасывания в кишечнике;
• энтериты (воспалительные заболевания тонкого кишечника);
• амилоидоз тонкого кишечника;
• колиты (воспалительные заболевания толстого кишечника);
• нарушения режима питания;
• заболевания поджелудочной железы (панкреатиты).

Изменение формы каловых масс может быть признаком:

• рака прямой кишки;
• полипа (доброкачественной опухоли) прямой кишки;
• геморроя;
• спазма анального сфинктера;
• поражения толстого кишечника (колита).

Изменения цвета каловых масс могут указывать на:

• характер принимаемой пищи;
• прием некоторых медикаментов;
• печеночную недостаточность;
• заболевания желчевыделительной системы (холангиты, камни в желчевыводящих путях);
• заболевания поджелудочной железы (недостаток пищеварительных ферментов);
• дисбактериоз (развитие патогенных бактерий в кишечнике);
• ускоренную моторику кишечника;
• кровотечения в желудочно-кишечном тракте;
• брюшной тиф;
• холеру.

Изменения запаха кала могут наблюдаться при:

• избытке белковой пищи;
• дисбактериозе;
• распаде опухоли в кишечнике;
• усилении процессов гниения и брожения в кишечнике.

Изменение кислотности каловых масс может указывать на:

• избыток белков в рационе;
• усиление процессов гниения в кишечнике;
• энтерит (воспалительный процесс в тонком кишечнике);
• гнилостный колит (воспалительный процесс в толстом кишечнике);
• панкреатит (поражение поджелудочной железы);
• поражения печени;
• механическую желтуху (поражение желчевыводящих путей);
• дисбактериоз.

Наличие непереваренных мышечных волокон и соединительной ткани в кале может быть признаком:

• панкреатита;
• недостаточности поджелудочной железы;
• недостаточной секреции желудочного сока;
• усиленной перистальтики (моторики) желудка и/или кишечника;
• плохого пережевывания пищи.

Наличие в кале большого количества перевариваемой клетчатки указывает:

• на ускоренную моторику желудочно-кишечного тракта;
• на анацидный гастрит (воспалительное заболевание желудка, сопровождающееся снижением выработки желудочного сока).

Наличие крахмала в кале может быть признаком:

• нарушений всасывания в тонком кишечнике;
• энтерита (воспаления тонкого кишечника);
• усиленной перистальтики кишечника;
• нарушений функций поджелудочной железы.

Появление в кале нейтральных жиров, жирных кислот и мыл может наблюдаться при:

• заболеваниях желчевыводящих путей;
• заболеваниях печени;
• заболеваниях поджелудочной железы;
• ускоренной моторике кишечника;
• энтерите (воспалении тонкого кишечника);
• заболевании щитовидной железы (тиреотоксикозе).

Появление большого количества слизи в кале указывает на:

• энтерит (воспаление тонкого кишечника);
• колит (воспаление толстого кишечника);
• дизентерию;
• язву кишечника.

Появление большого количества цилиндрического эпителия в кале является признаком:

• энтерита;
• колита;
• доброкачественных опухолей кишечника;
• злокачественных опухолей кишечника.

Появление лейкоцитов в кале указывает на:

• энтерит;
• колит;
• гастрит;
• дизентерию;
• неспецифический язвенный колит;
• туберкулезное поражение кишечника;
• другие инфекционные заболевания желудочно-кишечного тракта.

Появление следов крови в кале может указывать на:

• кровотечение в желудочно-кишечном тракте;
• язвенное поражение слизистой оболочки кишечника;
• воспалительное поражение желудочно-кишечного тракта (гастрит, энтерит, колит);
• распад опухоли в кишечнике;
• анальную трещину;
• геморрой;
• повреждение десен при чистке зубов.

Патогенные микроорганизмы появляются в кале при:

• дисбактериозах;
• дизентерии;
• лечении антибиотиками;
• усилении процессов брожения в кишечнике;
• грибковых поражениях кишечника и так далее.

Правила сдачи

Для начала следует придерживаться следующих правил, они помогут предотвратить недостоверность информации:

1. тщательная гигиена интимных органов;
2. исключение приема антибиотиков, слабительных;
3. исключение сдачи после рентгена;
4. отказ от жареной, острой, соленой еды и спиртных напитков.

В первом случае перед тем как собрать сформировавшийся стул следует хорошо омыть половые органы и заднее отверстие. Туда не должны попасть моча и слизистые выделения. Употребление медикаментов искажает картину анализа кала.

Так как уменьшение срока формирования массы может показать отсутствие элементов, влияющих на аномалии в организме. Недавно проведенный рентген желудочно-кишечного тракта исказит оценку копрограммы.

Необходимо воздержаться от жареного, острого, употребления мяса, рыбы. Нельзя употреблять томаты, свеклу, огурцы, капусту, маринованные овощи. На это время кушайте молочные блюда, кашу, отварной картофель, фрукты, яйца.

Как сдавать кал на копрограмму?

Нужна ли специальная подготовка перед забором кала на анализ?

Специальной подготовки перед проведением копрограммы не требуется. В то же время, существует ряд ограничений, которые следует учитывать перед назначением данного анализа.

Перед забором материала для копрограммы следует:

• Исключить любые клизмы или другие промывания кишечника. Данные процедуры исказят результаты исследования. Забор материала должен проводиться не ранее, чем через 24 часа после последней клизмы.
• Исключить ректальное (через анальный проход) введение медикаментов. Введение медикаментов (в том числе свечей) подобным путем исказит результаты исследований, так как нарушит физическое состояние каловых масс и их химический состав.
• Исключить прием препаратов, влияющих на пищеварение. К данным препаратам можно отнести активированный уголь (нарушает всасывание в кишечнике практически всех веществ), ферментативные препараты (могут скрыть заболевания поджелудочной железы или печени), лекарства, ускоряющие или замедляющие моторику кишечника и так далее (более подробный список медикаментов следует уточнять у врача). Ограничить прием данных медикаментов следует за 2 – 3 дня до анализа.

Нужно ли соблюдать диету перед проведением копрограммы?

В общем, диету перед проведением копрограммы соблюдать не обязательно. Перед забором материала специальной диеты должны придерживаться только те пациенты, у которых предполагается наличие кровотечения в желудочно-кишечном тракте (то есть, во время анализа каловых масс лаборант будет искать следы крови в них). Если перед этим пациент будет употреблять определенные продукты, это может привести к искажению результатов исследования.

При подозрении на наличие кровотечения перед копрограммой следует исключить из рациона:

• мясные продукты;
• рыбные продукты;
• яйца (любые);
• зеленые овощи и/или фрукты;
• препараты железа;
• препараты магния;
• препараты висмута.

Также за сутки перед забором материала таким пациентам не следует чистить зубы, так как травматизация десен зубной щеткой может привести к попаданию крови в желудочно-кишечный трак и искажению результатов исследования.

Как правильно собрать кал на копрограмму?

Непосредственно после акта дефекации следует снять с контейнера крышку и сразу набрать шпателем каловые массы в контейнер (его следует заполнить примерно на 25 – 30%)

При этом важно следить, чтобы в собираемый материал не попали следы мочи, менструальных выделений или воды из унитаза, так как это может привести к существенному искажению результатов исследования

Сразу после забора каловых масс следует плотно закрыть крышку на контейнере. Полученный материал нужно доставить в лабораторию как можно раньше. Если немедленно сделать это невозможно (например, забор материала был произведен вечером, когда лаборатория закрыта), контейнер можно хранить в холодильнике (при температуре от +4 до +8 градусов) в течение 8 – 12 часов.

При сборе кала на анализ недопустимо:

• Использовать нестерильную посуду. Запрещено собирать кал в спичечные или картонные коробки, так как это может изменить внешний вид кала, а также в него могут попасть посторонние включения. Кроме того, такой метод забора, хранения и транспортировки каловых масс представляет опасность для окружающих (повышается риск загрязнения и заражения бактериальной инфекцией).
• Хранить каловые массы при температуре выше +8 градусов. Высокая температура стимулирует рост бактерий, а также процессы гниения и брожения. Если каловые массы хранить при комнатной температуре, хотя бы в течение 2 – 3 часов, это может значительно исказить результаты анализа.
• Хранить каловые массы в течение более 12 часов. При длительном хранении материала изменяются его химические свойства, изменяется количество и характер микрофлоры и другие показатели. Если собранный материал не удалось доставить в лабораторию в течение 12 часов, его следует уничтожить. Для забора нового материала следует взять в аптеке или лаборатории новый (стерильный) контейнер. Нельзя промывать старый контейнер и использовать его для забора новой порции кала.

Зачем нужен анализ на обнаружение крови в кале

В каких случаях назначается этот анализ? По каким причинам врачи вдруг начинают искать в кале пациента скрытую кровь? Это делается при подозрении на ряд заболеваний.

Забор кала для анализа на скрытую кровь относится к распространенным лабораторным анализам, таким как общий анализ крови или мочи. С его помощью можно выявить неявное внутреннее кровотечение, которое присутствует:

• в любом из отделов кишечника;
• в желудке;
• во всех органах пищеварительной системы без исключения.

Чаще всего кровь в кале появляется при серьезных поражениях желудка, кишечника либо двенадцатиперстной кишки, что приводит к анемии и прочим опасным последствиям

Согласитесь, «увидеть», что происходит внутри пищеварительной системы, особенно в нескончаемом кишечнике, полная длина которого составляет у взрослого человека около восьми метров (в пять раз превышает его рост), достаточно сложно. Тем более что строение кишок замысловатое, а расположение извилистое.

Кишечник человека

Показания

Врачи назначают сдачу кала на скрытую кровь довольно часто. Показаниями к проведению анализа могут стать следующие симптомы и жалобы пациента.

1. Абдоминальные боли (локализующиеся в области живота) неясной этиологии.

2. Продолжающееся на протяжении долгого времени чувство тошноты при отсутствии диагностированных желудочно-кишечных заболеваний.

3. Периодически повторяющаяся рвота.
4. Постоянный жидкий или разжиженный стул.

5. Синдром Линча.

6. Дивертикулит.
7. Выявленный гельминтоз.

8. Болезнь Крона.

9. Потеря массы тела без очевидной причины.
10. Цирроз печени.
11. Диагностированные патологии ЖКТ.

12. Аденоматозный полипоз.

13. Язвенные поражения желудка.
14. Язвы в кишечнике.

15. Варикозное расширение вен в пищеводе.

16. Рак кишечника или колоректальный рак у близкого родственника пациента.
17. НЯК.
18. Повреждения слизистой пищеварительных органов.

Есть условия, при которых исследование кала, выявляющее скрытую кровь проводить нельзя, до изменения обстоятельств:

• диспепсия;
• менструация;
• кровоточащие геморроидальные узлы;
• гематурия (когда кровь обнаружена в моче);
• пародонтоз.

Параллельно исследованию кала назначается лейкоцитарный анализ крови, биохимия, исследование мочи общее, почечные пробы и онкомаркеры.

Нормы анализа крови

Почечные пробы

Колоноскопия кишечника

Как повысить эффективность исследования

От того, насколько тщательно подготовится пациент к сдаче анализа, зависит эффективность исследования. Скрупулезность исполнения всех предъявляемых к пациенту требований – залог точности полученного результата.

Общая подготовка к сдаче кала на скрытую кровь проводится следующим образом.

1. Начало подготовки – 7 дней до проведения анализа. С этого времени отменяются все лекарства, которые имеют свойство окрашивать кал в какой-либо цвет. Также необходимо прекратить прием медицинских препаратов, влияющих на кишечную перистальтику.

2. За трое суток до сдачи кала из меню исключается следующее: мясо, рыба, субпродукты, томаты, свекла, перец, брокколи, фасоль, шпинат, яблоки, зеленый лук. Это необходимо для предотвращения искажения цветовой картины.

3. Также за трое суток прекращается употребление овощей и фруктов, которые могут подействовать на перистальтику.

4. Нельзя принимать слабительные препараты и очищать кишечник никаким другим способом, кроме естественного, особенно с применением клизмы.

5. Позднее, чем за три дня до сдачи анализа не проводятся рентгенологические исследования, поскольку при их проведении могут использоваться реактивы, способные исказить результаты анализа.

6. Перед забором кала для анализа у женщин должны полностью закончиться месячные (во время менструального кровотечения анализ не проводится).

7. Накануне сдачи кала нельзя чистить зубы, чтобы при случайном повреждении десен щеткой фрагменты крови не попали в кал.

8. Также нельзя заниматься анальным сексом, чтобы предотвратить образование механических повреждений и разрывов с возникшими кровотечениями.

Правила забора анализа

При сборе кала на анализ необходимо соблюсти ряд правил.

1. Не пытаться собрать кал при помощи клизмы – дефекация должна пройти естественно.
2. Собирать кал утром, после пробуждения, желательно до завтрака.
3. Перед сбором помочиться и тщательно вымыть половые органы и сфинктер.

4. Использовать для сбора специальную деревянную лопатку и контейнер для анализов с плотной крышкой, он может быть из пластика или стекла.

5. Брать разные фрагменты кала (не из одного места).
6. Общий объем должен составить не менее двух чайных ложек.
7. В лабораторию кал доставляется не позднее чем через три часа после сбора.

8. Если немедленно доставить анализ невозможно, это делается в течение 12 часов, но контейнер с материалом должен храниться все это время в холодильнике.

Бак посев — метод диагностики инфекций

Бак посев (бактериологический посев) — это лабораторный анализ, с помощью которого врач может установить тип микроорганизмов, вызвавших тот или иной воспалительный процесс. Как же его проводят?

Небольшое количество биологического материала — кровь, моча, кал, выделения из носа и т. д. — наносят очень тонким слоем на специальные питательные среды. Например, сахарный бульон, или агар. Это и называется «посеять».

После этого пробирки помещают в термостат, в котором поддерживается «приятная» для бактерий температура. То есть создают такие условия, чтобы бактерии начали размножаться. А потом их изучают.

Бак посев позволяет не только определить возбудителя заболевания, но и установить его чувствительность к антибиотикам. Это дает возможность врачу выбрать наиболее эффективную схему лечения.

Бак посев относится к микробиологическим исследованиям, он проводится в лаборатории посредством помещения биоматериала в благоприятные температурные и питательные условия.

Процедура позволяет выявить в материале микроорганизмы патогенного характера для назначения лечения. С помощью бак посева не только выявляют причину инфекции, но проводят исследования на чувствительность возбудителя болезни к антибиотикам.

Когда назначается проба?

Любой человек без тревожных симптомов инфицирования может являться носителем паразитов. Цель исследования кала ‒ обнаружить потенциальную угрозу.

Проба назначается:

• Как обязательная процедура для людей, работающих в сфере питания, торговой отрасли и общеобразовательных заведениях.
• При оформлении ребёнка в детский сад или школу.
• Для получения справки на посещение бассейна.
• Данное исследование периодически проводится у медицинского персонала.

Это позволить обнаружить носителя и предотвратить дальнейшее заражение.

Проба рекомендуется и при данных жалобах:

• Бессонница.
• Позывы к рвоте.
• Жидкий кал и метеоризм.
• Малейшая нагрузка вызывает недомогание.
• Раздражительность.
• Заметное снижение веса.

Кал на анализ рекомендуется сдавать:

• После отдыха в экзотической стране, в которой высокий уровень инфицирования.
• Если самочувствие резко ухудшилось после купания в грязном водоёме, где мог хлебнуть заражённой воды.
• При наличии заболеваний репродуктивной системы.

Иногда, симптомы сигнализируют о присутствии паразитов, а копрограмма не выявляет их наличия. В этом случае, назначают ещё одно исследование или проводят дополнительные анализы, например, иммуноферментный или ПЦР.

Оценка результатов анализов кала

Результаты теста кала, полученные в лаборатории, должны быть показаны врачу, который их назначил

На что доктор обратит внимание?

• PH стула.  Снижение РН ниже 6,0 указывает на нарушение всасывания и усвоения углеводов;
• Наличие углеводов. Появление глюкозы, фруктозы, лактозы, сахарозы, пентозы в кале указывает на эндокринную недостаточность поджелудочной железы, дефицит дисахаридазы, синдром короткой кишки;
• Наличие жира. Жир (кристаллы холестерина и мочевой кислоты) в объеме более 80 кристаллов — признак синдрома мальабсорбции, хронического панкреатита, целиакии, цирроза печени;
• Кровь в кале. Причиной может быть желудочно-кишечное кровотечение или развитие колоректального рака;
• Наличие патогенных бактерий. Присутствие сальмонеллы, шигеллы, кампилобактера, кишечной палочки, клостридии указывает на бактериальную инфекцию.

Врач, рассмотрев результаты анализа кала, может назначить дополнительные исследования. Например, часто назначаются УЗИ брюшной полости, биохимический анализ крови, анализы на онкомаркеры, печеночные пробы.

Анализ кала на энтеробиоз, как сдавать

Для осуществления максимально точной и правильной диагностики анализа кала на энтеробиоз важно ограничить себя от ошибок при сборе биологического материала, подлежащего исследованию. На конечный результат оказывают влияние такие факторы, как: скорость его доставки в лабораторию, предварительный прием лекарственных препаратов, соблюдение правил сбора кала, качество работы лаборантов, сроки откладывания яиц острицами

На конечный результат оказывают влияние такие факторы, как: скорость его доставки в лабораторию, предварительный прием лекарственных препаратов, соблюдение правил сбора кала, качество работы лаборантов, сроки откладывания яиц острицами.

Анализ кала на энтеробиоз следует брать несколько раз, особенно в том случае, если имеется подозрение на глистную инвазию. Дело в том, что существует высокая вероятность попасть в так называемый «немой период», когда самки остриц находятся в кишечнике и ждут созревания яиц. В это время обнаружить особей гельминтов или их яйца в фекалиях достаточно проблематично.

Перед сдачей анализа кала на энтеробиоз необходимо подготовиться. Для этого нужно исключить использование любых ректальных свечей, не делать очистительных клизм, не принимать антибиотики и слабительные препараты. В противном случае кал для анализа на энтеробиоз будет непригоден.

Подготовка к анализу кала на энтеробиоз

Образцы кала нужно брать из различных участков каловых масс: сбоку, снизу, с внутренней части. Таким образом удастся повысить информативность исследования. Если вдруг человек самостоятельно увидел в фекалиях паразитов или их части, то обязательно следует сложить обнаруженный материал в емкость, которая будет отправлена в лабораторию.

Что касается объемов, которые необходимо собрать. Минимальный объем составляет около двух чайных ложек. Меньшее количество кала не позволит получить достоверной информации о глистной инвазии.

Тара, которая предназначена для сбора кала, должна быть непроницаемой и должна иметь плотную крышку. Очень удобно для этой цели воспользоваться специальными контейнерами, которые имеются в продаже в аптечных пунктах.

Как правило, в комплекте с контейнером идет ложечка с помощью которой удобно собирать биоматериал. Хотя можно воспользоваться спичным коробком или обычной баночкой. Контейнер нет необходимости стерилизовать, достаточно его хорошо вымыть.

Чем раньше образцы будут доставлены в лабораторию, тем информативнее будет результат. Однако, кал может быть не совсем свежим, допускается его хранение в определенных условиях на протяжении суток. Следует позаботиться о том, чтобы в контейнер и на каловые массы не попали посторонние примеси.

В данном случае речь идет о моче или влагалищных выделениях. Поэтому перед опорожнением кишечника желательно помочиться. Если на момент проведения анализа у женщины менструация, то следует воспользоваться тампоном. Лишь после этого можно приступать к сбору материала.

Если нет возможности отправить контейнер с биоматериалом в лабораторию сразу, то его следует плотно закрыть и поставить в холодильник. Там он может храниться при температуре от 0 до +4 градусов не более 24 часов. Если нарушить правила хранения кала, то это негативно отразиться на интерпретации данных.

По возможности на исследование нужно доставить утреннюю порцию кала

Важно не забыть подписать контейнер перед сдачей его в лабораторию. Указать нужно не только свои инициалы, но и дату сбора материала

Анализ кала. Следует заранее настроиться на то, что кал на энтеробиоз потребуется сдавать около трех раз, а может даже больше (не более пяти раз).Когда для исследования требуется кал ребенка, его можно взять из детского горшка или из подгузника.

Если человек знает, что ему не удастся доставить кал в лабораторию за стуки, а возможности собрать новую порцию не будет, то следует сразу собирать биоматериал в специальный раствор. Для этого подойдет 70% этиловый спирт, который по рецепту можно приобрести в аптеке.

Кроме того, можно воспользоваться 50% раствором глицерина. Для этого глицерин нужно смешать с дистиллированной водой (90 мл воды, 50 мл глицерина). В полученном составе можно хранить кал на протяжении 2-3 недель. На одну часть кала потребуется три части консерванта.

Подготовка к исследованию

Для получения более точных результатов необходимо подготовиться к сдаче анализа:

1. За три дня перед сдачей следует внести коррективы в повседневное меню.
2. Запрещен прием медикаментов, со слабительным эффектом, антибиотиков.
3. Перед сдачей анализа за три дня следует отказаться от вредных привычек: не курить, не принимать алкоголь и наркотики.

Список запрещенных продуктов при подготовке к сдаче анализа:

• все, что может вызвать вздутие и расстройство кишечника: огурцы, свекла, капуста;
• фрукты, характеризующиеся послабляющим воздействием: груши, апельсины;
• ягоды, раздражающие кишечник: вишня, ежевика, малина, клубника.

В минимальных дозах рекомендуется употреблять компоты и кисели из ягод.

Кровь в кале

Дети на грудном вскармливании	отсутствует
Дети на искусственном вскармливании	отсутствует
Дети старшего возраста	отсутствует
Взрослые	отсутствует

• Геморрой
• Трещины заднего прохода
• Проктит
• Язвенный колит
• Полипы прямой кишки
• Инфекции ЖКТ
• Язва желудка
• Язва 12-перстной кишки
• Дивертикулы
•  Расширение вен пищевода (при циррозе)
• Опухолевые заболевания ЖКТ

• Прожилки крови в кале – обычном или жидком. Могут свидетельствовать о неспецифическом язвенном колите, болезни Крона, опухолях желудочно-кишечного тракта (рак толстого кишечника, рак прямой кишки).
• Кровь алого цвета, не смешанная с каловыми массами. Признак трещины заднего прохода либо внутреннего геморроя.
• Алая кровь, остающаяся на туалетной бумаге. Бывает как при геморрое и трещине заднего прохода, так и при раке прямой кишки.
• Кровь, остающаяся на нижнем белье. Может говорить о наличии злокачественного новообразования в прямой кишке.
• Наличие в кале крови и слизи. Встречается при проктите, язвенном колите, опухолях и полипах прямой кишки.
• Кровь в жидком кале. Частый жидкий стул с вкраплениями крови и слизи, скорее всего, имеет инфекционную природу.
• Кал черного цвета. Его появление вызвано язвой желудка или раком желудка, расширением вен пищевода, которое происходит при циррозе печени.
• Обильное кровотечение из прямой кишки. Характерно для ишемического колита и дивертикулеза прямой кишки.